Calibração de Micropipetas, Buretas e Dosadoras

A Calibração de Micropipetas consiste na medição gravimétrica de pontos determinados de volumes específicos para a determinação da incerteza volumetrica e os erros volumétricos de dosagem. Neste processo além das medições, são feitas verificações das partes da micropipeta como:pistão, mecanismo de acinonamento, o-rings e ajustes de volumes.

Calibração de Micropipetas - Normas

Na Calibração de Micropipetas a medição dos volumes são feitos de acordo com norma ISO-8655 onde são descritos os procedimentos para calibração de vários vidrarias e sistemas de dosagem, dentre eles pipetas e micropipetas. Assim, ao inciar-se a calibração, são necessárias as verificações das seguintes variáveis:

Local de teste: o local deve ter temperatura (oC) e umidade relativa do ar (%UR);
Evaporação: para volumes menores que 50uL deve-se ter proteção para evaporação no vaso de teste;
Ciclo de testes: afim de garantes uma melhor reprodução de resultados, o tempo entre as medições deve ser padronizado;

Através destas leituras feitas na calibração de micropipetas é possível verificar e atestar quais os erros e desvios do equipamento que, comparando com especificações do fabricante, permitindo os ajustes para um melhor desempenho e precisão em suas leituras.

Calibração de Micropipetas - Funcionamento

Como funciona uma micropipeta de deslocamento de ar?

O pistão se move para a posição apropriada quando o volume é definido.
Quando o botão de operação é pressionado até a primeira parada, o pistão expele o mesmo volume de ar indicado na configuração do volume.
Depois de mergulhar a ponta no líquido, o botão de operação é liberado. Isso cria um vácuo parcial e o volume especificado de líquido é aspirado para a ponta.
Quando o botão de operação é pressionado até a primeira parada novamente, o ar dispensa o líquido. Para esvaziar a ponta completamente, o botão de operação é pressionado até a segunda parada (sopro).

Pipeta por deslocamento de ar

Fatores que afetam a precisão das micropipetas de deslocamento de ar:

Temperatura
O fator mais importante na precisão da pipetagem é a temperatura do líquido. A figura abaixo mostra a mudança de volume quando o líquido tem uma temperatura diferente da pipeta e do ar. Se a temperatura do líquido, pipeta e ar forem iguais, a precisão não é significativamente afetada.
Densidade
Densidade é a relação massa / volume do líquido. A densidade varia de acordo com a temperatura e pressão do ar. Normalmente, a densidade da água é 0,996 kg / dm3, para etanol 0,79 kg / dm3 e para ácido sulfúrico (H2SO4) 1,85 kg / dm3.
Altitude
A altitude geográfica afeta a precisão por meio da pressão do ar. A pressão do ar diminui em altitudes mais elevadas e o fator de conversão Z também diminui. O ponto de ebulição de alguns líquidos também pode mudar para bastante próximo da temperatura ambiente, aumentando drasticamente a perda por evaporação.

Fatores que influenciam a pipetagem

Como funciona uma micropipeta de deslocamento positivo?

O pistão se move para a posição apropriada quando o volume é definido.
Quando o botão de operação é pressionado até o fim, o pistão desce até a abertura da ponta.
Depois que a ponta é imersa no líquido, o botão de operação é liberado. O êmbolo é então levantado e um vácuo parcial é criado. Isso faz com que o líquido entre na ponta.
Quando o botão de operação é pressionado novamente, o pistão desce, expelindo o líquido da ponta.

pipeta de deslocamento positivo

Calibração de Micropipetas - Procedimento

O procedimento de calibração de micropipetas consiste em:

Após o recebimento, cada micropipeta foi cuidadosamente desempacotada e inspecionada quanto a quaisquer sinais de danos visíveis.
Qualquer dano visível encontrado é comunicado ao cliente imediatamente. O cliente será informado se o dano for reparável e qual será o custo adicional cobrado.
Todas as micropipetas do cliente são contadas e comparadas com a quantidade relatada na Ordem de Serviço fornecida.
Quaisquer discrepâncias de quantidade são informadas ao cliente imediatamente.
Cada Ordem de Serviço será colocada em uma caixa de armazenamento interna separada até agendada para Calibração.
Números separados de ID de trabalho são atribuídos a cada ordem de serviço.
As informações do cliente são verificadas quanto a quaisquer discrepâncias em relação às registradas e serão corrigidas, se necessário.
Todas as micropipetas são inseridas no banco de dados do sistema sob o número de ID do trabalho atribuído com o número de ID atribuído a cada instrumento.

Calibração de Micropipetas - Pré-calibração

Conforme encontrado As, os dados obtidos e registrados antes da calibração e quaisquer ajustes da pipeta também são registrados.
Cada micropipeta será testada nos pontos de alcance mais baixo e mais alto, conforme especificado pelo fabricante. Dez testes realizados em cada ponto.
Todas as peças são inspecionadas cuidadosamente, o pistão é polido na maioria dos casos, a vedação do pistão e o o-ring são substituídos, bem como todas as peças defeituosas e com defeito.

Calibração de Micropipetas - Calibração

A micropipeta é mantida na sala de calibração por pelo menos 2 horas antes da calibração para atingir o equilíbrio com as condições da sala de teste.
A micropipeta é verificada no volume máximo (volume nominal) e no volume mínimo ou 10% do volume máximo, o que for maior.
Uma série de dez pipetagens é realizada com ambos os volumes.
Calcule a exatidão e a precisão usando a fórmulas da norma. Se os resultados calculados estiverem dentro dos limites fornecidos no livreto de instruções de uso, a calibração da micropipeta está correta. Caso contrário, a pipeta deve ser ajustada para o volume mais baixo e verificada novamente.

Importância da Calibração de Micropipetas

Com o procedimento de calibração de micropipetas é possível determinar se a micropipeta, bureta ou dosadora está dentro dos parâmetros especificados pelo fabricante e assim apto para uso. Também determina-se o erro máximo volumétrico e a incerteza expandida (k=2).

A Labnova é especializada em calibração de micropipetas, buretas e dosadoras, atendendo Indústrias, Institutos de Pesquisa e Universidades em todo o Brasil.

Normas ASTM relacionadas

ASTM E542-01, Prática padrão para Calibração de Laboratório volumétrica Apparatus, ASTM International, West Conshohocken, PA, 2001, www.astm.org

ASTM E969-02, Especificação padrão para vidro volumétrico (Transfer) Pipetas, ASTM International, West Conshohocken, PA, 2002, www.astm.org

ASTM E1878-97, Especificação padrão para laboratório de vidro Garrafas Volumetric, uso especial, ASTM International, West Conshohocken, PA, 1997, www.astm.org